人絨毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotropin,HCG）是由滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，由α和β兩個亞基組成，α亞基負(fù)責(zé)與相應(yīng)受體結(jié)合，β亞基發(fā)揮生活學(xué)活性。由于α亞基與垂體分泌的卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和促甲狀腺激素（TSH）的α亞基相似，而β亞基則是特異的，因此一般用針對β-HCG的抗體來測定標(biāo)本中的HCG，以防止出現(xiàn)交叉反應(yīng)。
因為HCG的濃度與懷孕的進(jìn)程密切相關(guān)，因此常用來診斷早期妊娠、異位妊娠、先兆流產(chǎn)、產(chǎn)后及人工流產(chǎn)術(shù)后的監(jiān)測。臨床常用來檢測HCG的標(biāo)本包括血清和尿液兩種，而常用的檢測方法則有早孕試紙（通常為膠體金法）和發(fā)光法的定量檢測，通常情況下都是用早孕試紙對尿液標(biāo)本進(jìn)行定性檢測，而用發(fā)光法對血液標(biāo)本進(jìn)行定量檢測，大多數(shù)情況下兩者檢測結(jié)果具有一致性，但也有少數(shù)情況下兩者結(jié)果并不一致，今天就和大家一塊學(xué)習(xí)下兩者結(jié)果不一致的可能原因。
兩種檢測方法的原理
在分析原因前我們首先看一下兩種檢測方法的原理，因為搞清楚檢測原理對我們理解結(jié)果的不一致至關(guān)重要。
首先，我們來看一下早孕試紙也就是膠體金法的檢測原理：膠體金法檢測HCG
采用的是雙抗體夾心法，由抗β-HCG單克隆抗體和抗鼠的多克隆抗體分別固定于硝酸纖維膜的檢測（T）區(qū)和質(zhì)控（C）區(qū)，而膠體金標(biāo)記的抗α-HCG單克隆抗體作為流動相，當(dāng)標(biāo)本中含有HCG時，標(biāo)本中的HCG首先和膠體金標(biāo)記的抗α-HCG單克隆抗體結(jié)合，流動到T區(qū)時，和T區(qū)的抗β-HCG單克隆抗體結(jié)合被固定，造成T線顯色，剩余的流動相繼續(xù)流動到C區(qū)與抗鼠的多克隆抗體結(jié)合，造成C線顯色。
其次，我們再來看一下發(fā)光法的檢測原理，不同廠家的發(fā)光法原理存在著差異，但基本原理是一樣的，都是雙抗體夾心法，其中一個抗體固定在相應(yīng)的固相上（例如磁微粒），另一個為標(biāo)記抗體，與膠體金法不同的時，兩個抗體是針對不同抗原位點的抗β-HCG單克隆抗體。
雖然膠體金法和發(fā)光法均采用雙抗體夾心法，但由于所用抗體、標(biāo)記物、方法學(xué)等的不同，二者在檢測結(jié)果方面存在著差異：
1、膠體金法是定性方法，而發(fā)光法是定量方法；
2、膠體金法由于用的兩種抗體是抗α-HCG單克隆抗體和抗β-HCG單克隆抗體，因此檢測的是完整的HCG，而無法檢測游離的β-HCG，而發(fā)光法使用的是兩種不同的抗β-HCG單克隆抗體，除了可以檢測完整的HCG，還可以檢測游離的β-HCG；
3、兩者的檢測敏感度及檢測范圍不同，膠體金法的檢測下限在20-40mIU/ml，而發(fā)光法可以檢測到1mIU/ml以下，發(fā)光法的檢測范圍也遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膠體金法，在HCG濃度很高時，更不容易出現(xiàn)鉤端效應(yīng)。
HCG結(jié)果不一致原因分析
1、HCG濃度低造成的檢測結(jié)果不一致
我們前面提到過膠體金法和發(fā)光法的檢測下限存在著差異，當(dāng)標(biāo)本中的HCG濃度比較低時，會出現(xiàn)發(fā)光法陽性而膠體金法陰性的不一致結(jié)果。HCG濃度低也存在不同情況，有可能是病人標(biāo)本中的HCG濃度本身就低，還有可能是人為稀釋造成的，例如孕初期病人做B超前要憋尿，大量飲水造成尿液稀釋，這時候也會出現(xiàn)尿HCG陰性，而血HCG陽性的情況。
2、HCG變體造成的檢測結(jié)果不一致
在人體內(nèi)HCG并不是一成不變的，除了規(guī)則HCG以外，還存在多種變體，例如：高糖基化hCG、游離β-HCG、游離α-HCG，以及各種不同的hCG碎片，如缺刻分子hCG、缺刻的游離β-HCG、高糖基化游離β-HCG以及在尿中檢到的游離β-HCG核心片段。這些HCG變體也會造成檢測結(jié)果的差異，例如β-HCG核心片段僅在尿液中可以檢測到，高濃度的β-HCG核心片段可以產(chǎn)生鉤狀效應(yīng)，使尿HCG產(chǎn)生假陰性，而血HCG則不受其影響依然為陽性。
3、抗體干擾造成的檢測結(jié)果不一致
由于現(xiàn)在HCG檢測使用的抗體基本上都是鼠源性的單克隆抗體，部分患者由于與小鼠有密切接觸或者曾被小鼠咬傷過或者接受過鼠源性抗體治療，體內(nèi)存在著針對鼠源性抗體的抗抗體即非特異性的異嗜性抗體這種抗體會與HCG抗體結(jié)合，從而產(chǎn)生HCG假陽性。但是，異嗜性抗體分子量較大，無法通過腎小球的機械屏障分泌到尿中，因此不會干擾尿HCG的檢測，此時也會產(chǎn)生檢測結(jié)果的不一致。
4、鉤狀效應(yīng)造成的檢測結(jié)果不一致
鉤狀效應(yīng)即HOOK效應(yīng),是指由于抗原抗體比例不合適而導(dǎo)致假陰性的現(xiàn)象，其中抗體過量叫做前帶效應(yīng)，抗原過量叫做后帶效應(yīng)。懷孕8-10周時孕婦體內(nèi)HCG濃度達(dá)到峰值，有些孕婦體內(nèi)HCG濃度可以達(dá)到數(shù)十萬，此時過高的HCG可能會造成檢測中出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)，導(dǎo)致假陰性的出現(xiàn)，由于膠體金法的檢測范圍較窄，更容易受鉤狀效應(yīng)的影響，而發(fā)光法檢測范圍寬，比較不容易受鉤狀效應(yīng)的影響，此時也會出現(xiàn)檢測結(jié)果的不一致。
5、其他垂體激素干擾造成的檢測結(jié)果不一致
由于HCG的α亞基與垂體分泌的卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）和促甲狀腺激素（TSH）的α亞基相似，而β亞基與LH的β亞基結(jié)構(gòu)也非常相似（在121個氨基酸分子中,有97個兩者是完全相同的），因此一些高濃度的垂體激素會造成交叉反應(yīng)，造成檢測結(jié)果的不一致。但由于現(xiàn)在的檢測試劑都是高純度的抗β-HCG單克隆抗體，這種交叉反應(yīng)已經(jīng)非常罕見。
6、不同試劑不同方法學(xué)造成的檢測結(jié)果不一致
我們前面提到過檢測標(biāo)本中的HCG是不同HCG變體組成的，分子結(jié)構(gòu)有差異，但有相同抗原性的混合物。不同廠家使用的抗體不同，針對的抗原位點也存在著差異，因此使用不同廠家的試劑也可能造成檢測結(jié)果的不一致，有些甚至可以相差數(shù)十倍。
上面我們分析了幾種造成HCG檢測結(jié)果不一致的情況，但試劑的臨床工作中情況往往要更加復(fù)雜，一定要多多與臨床交流，根據(jù)不同的情況采取不同的檢測策略，避免踩到陷阱，讓我們的檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確。
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